نسخه قابل چاپ درس 1 (فصل 1و2 )

2-2- پارامترهاي مؤثر بر خصوصيات كلي "فرايند عمليات پايين دستي"

اين پارامترها به منزله شناسنامه فرايند هستند و خصوصيات فرايند از نقطه شروع تا پايان برای رسيدن به محصول مورد نظر را مشخص مي کنند.

2-2-1-درصد بيان  (% expression)

پارامتري است كه ميزان توليد و بيان پروتئيني خاص را نسبت به ساير پروتئين هاي توليد شده توسط سلول بيولوژيك مورد نظر نشان مي دهد . با وجود آنکه درصد بيان در "فرايند عمليات  بالادستي" كنترل و بهينه  مي گردد, اما به عنوان يكي از ويژگي هاي ماده شروع كننده در "فرايند عمليات پايين دستي" از اهميت خاصي برخوردار است, چراكه به شدت بر كارآيي و بازدهي اين عمليات تأثير  مي گذارد . از اين رو براي طراحي يك "فرايند عمليات پايين دستي" مناسب ، بايد درصد بيان پروتئين قبلاً توسط متخصصين فرمانتاسيون بهينه شده باشد .

از طرف ديگر لازم به يادآوري است كه بسته به منبع اوليه توليد پروتئين از نظر نوع ميكروارگانيزم و طبيعي يا نوتركيب بودنِ آن, ميزان بيان پروتئين محدود است. بهرحال يكي از مزيتهاي استفاده از تكنيك هاي نوتركيب  ( يعني اصلاح يا دستكاري يك ميكروارگانيزم با استفاده از روشهاي مهندسي ژنتيك درجهت توليد و بيان يك محصول خاص ), مخصوصاًَ درمورد ميكروارگانيزمهايي نظير اِشرشياكلي Esherishia coli ، ميزان بيان بالاي پروتئين مورد نظر نسبت به ساير پروتئينهاي توليد شده توسط ميكروارگانيزم مورد بحث است.

2-2-2- درجه خلوص (% Purity) 

اين پارامتر در واقع بيان كنندة ميزان جداسازي پروتئين مورد نظر نسبت به مواد ديگر يا   ناخالصي هاي ديگر ( از جمله ويروسها ، باكتريها ، پروتئينهاي ديگر ، نوكلئيك اسيدها و اندوتوكسين ها ) است. همانطوريكه درفصل قبل مطرح شد، درجه خلوص يك نمونة بيولوژيك نسبت به دو خصوصيت يعني خلوص عاملي و خلوص شيميايي مطرح مي شود ( رجوع کنيد به 1-2-2-1).

2-2-3- بازيابي (%Recovery) 

ميزان بازيافت و مقدار پروتئين خالص شده در فرايند نسبت به مقدار پروتئين اولية موجود درمحصول قبل از فرايند بعنوان بازيابي تعريف مي شود. اين پارامتر مي تواند در مورد هر مرحله خالص سازي مطرح شده و درعين حال به عنوان يك پارمتر كلي تر درمورد كل فرايند تخليص, که شامل چندين مرحله تخليص است, مطرح گردد. بهرحال اين پارامتر بيشتر معياري جهت مقايسه مقدار جرميِ پروتئين بدست آمده از يك فرايند نسبت به مقدار پروتئين موجود در نمونه تخليص نشده است.

2-2-4- بازيابي محصول (Yield)

 گرچه واژه yield و Recovery بسيار نزديك به هم بوده و گاه مترادف هم بشمار مي روند, اما واژه yield درواقع عبارت است از ميزان بازيافت پروتئين خالص شده كه داراي فعاليت بيولوژيك بوده و نسبت به مقدار اولية پروتئين قبل از فرايند تخليص مطرح مي شود . بنابراين درمورد بازيابي محصول (yield) تنها مقدار جرم پروتئين مطرح نبوده بلكه اساس, ميزان بازيابي فعاليت محصول بوده و با استفاده از تست هاي مناسب فعاليت (معمولاًIn vitro ) ميزان فعاليت محصول بعد از تخليص محاسبه مي گردد. بنابراين جهت بدست آوردن حداكثر  yield براي يك محصول, بهينه سازي فرايند از نظر انجام حداقل مراحل تخليص و كم كردن زمان فرايند بسيار مهم است به طوری که  حتي الامكان از عملکرد عواملي كه فعاليت محصول را به خطر مي اندازند, نظير پروتئازها و يا عوامل تخريب كننده ساختار پروتئين, جلوگيري شود . اين درحالي است كه واژه Recovery از نظر بدست آوردن بيشترين مقدار جرم محصول بعد از فرايند پايين دستي مطرح است, كه بازهم با استفاده از حداقل مراحل تخليص سعي مي شود كه ميزان ضايعات محصول درمراحل مختلف به حداقل مقدار ممكن برسد.

ادامه...

 

فهرست مطالب...

يادداشت برداريد...

تقويم...

بحث در مورد اين درس...

نظرخودرا منعكس كنيد...

نامه الكترونيكي به سايرين...

خروج از كارگاه...

If you have problem to view this page in Farsi please download these fonts: Mitra    Lotus   Titr in your directory of windows\fonts

or adjust Enconig of your explorer (from View menu) to unicode UTF-8